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家畜口蹄疫(FMD)與豬傳染性水皰病是急性、熱性、高度接觸性的偶蹄類(lèi)家畜傳染病，對(duì)人和動(dòng)物危害嚴(yán)重，又可造成巨大經(jīng)濟(jì)損失�？谔阋哂捎谪i、牛、羊等主要家畜均可感染并能形成全球性大規(guī)模的流行，所以又被國(guó)際獸疫局(OIE)列為A類(lèi)家畜傳染病之首。筆者認(rèn)為，可從以下10個(gè)要點(diǎn)予以準(zhǔn)確鑒別診斷。
1.病源體的結(jié)構(gòu)與形態(tài)特征
1.1鼻病毒簇的口蹄疫病毒(FMDV)，是一種顆粒呈球形的微細(xì)核糖酸病毒。分為大小二種：大的直徑在20～30納米(一般為25納米)，這種顆粒具感染性；小的直徑在7納米，是大顆粒的亞單位，不具感染性。病毒的浮密度為1.38～1.42克/毫升，沉降系數(shù)為140S～150S。
1.2 豬水皰病病源為腸道病毒簇的水皰病毒(SVDV)，是略呈球形的小型病毒。主要成分為核糖核酸(RNA)。直徑25～30納米，外無(wú)套膜。浮密度為1.34～1.35克/毫升，沉降系數(shù)為154S。
2.病毒的型別
2.1口蹄疫病毒有歐洲型A、O、C；亞洲I型ASiai；南非I型SAT1、南非Ⅱ型SAT2、南非Ⅲ型SAT3七個(gè)血清型。
2.1.1血清型可根據(jù)核酸同源性大小分為二群，OAC和ASiai為第一群，SAT1、SAT2、SAT3為第二群。群內(nèi)各同源性達(dá)60%～70%，但二群之間同源性僅為25%～40%，血清型間無(wú)血清交叉和交叉免疫現(xiàn)象。
2.1.2 二十世紀(jì)七十年代已發(fā)現(xiàn)62個(gè)亞型：A型29個(gè)，O型10個(gè)，C型4個(gè)，亞洲I型5個(gè)，非洲I型7個(gè)，非洲Ⅱ型3個(gè)，非洲Ⅲ型有4個(gè)。
2.1.3八十年代后對(duì)新亞型不再編號(hào)，已不再?gòu)?qiáng)調(diào)亞型的鑒定。
2.1.4各型和亞型的口蹄疫病毒，由于分子結(jié)構(gòu)上的不同差異，其抗原性彼此不同，在外界環(huán)境的長(zhǎng)期影響之下又會(huì)發(fā)生新的變異。各型之中以A型的毒力最強(qiáng)，O型次之。
2.2水皰病毒有型的差異。有的毒株毒性較差，僅蹄殼脫落不能行動(dòng)，死亡率低。有的毒株毒性強(qiáng)，發(fā)生流產(chǎn)，死亡率可高達(dá)100%。
3.病毒的抗原性
3.1 口蹄疫病毒有三種抗原：
3.1.1第一種抗原，有感染力，為25納米大小的病毒顆粒所具有的抗原，其沉降系數(shù)為140S，這種抗原有型的特異性。
3.1.2第二種抗原，是病毒的蛋白質(zhì)成分，即亞學(xué)位，是7納米的顆粒所具有的抗原，其沉降系數(shù)為12S，有型的特異性。
3.1.3第三種抗原，它不是病毒的成分，而是動(dòng)物感染病毒后其組織內(nèi)所發(fā)生的一種抗原，即與病毒感染有關(guān)的抗原(VIA抗原)，無(wú)型的特異性。
3.2水皰病毒與豬的腦脊髓炎病毒及豬的其它腸道病毒沒(méi)有血清學(xué)上的親緣關(guān)系。
4.病毒的組織培養(yǎng)
4.1牛的甲狀腺、牛腎、豬腎細(xì)胞的原代培養(yǎng)及豬腎的傳代細(xì)胞，BHK(金田鼠腎)細(xì)胞都對(duì)口蹄疫病毒有易感性，并能產(chǎn)生細(xì)胞病變。所以，這些細(xì)胞都能用于病毒的分離。由于病毒毒株不同，各種細(xì)胞的易感性也有差異。牛腎細(xì)胞在產(chǎn)生細(xì)胞病變后，有時(shí)會(huì)因未破壞細(xì)胞的增殖而得到恢復(fù)，外觀上不顯現(xiàn)細(xì)胞病變，不適用于診斷。 牛甲狀腺細(xì)胞對(duì)所有的野外毒株都有較大的易感性，接種24小時(shí)后可出現(xiàn)細(xì)胞病變�？蛇m用于診斷。
4.2水皰病毒在哺乳豬的腎臟細(xì)胞和哺乳金田鼠的腎臟細(xì)胞上均可生長(zhǎng)并產(chǎn)生細(xì)胞致病作用，使細(xì)胞變圓脫離，形成蝕斑，大片脫落，在致病細(xì)胞內(nèi)，病毒呈晶格狀排列。
5.病毒對(duì)動(dòng)物的易感性、傳染途徑與流行特點(diǎn)
5.1口蹄疫病毒以牛最易感染，尤其是黃牛、奶牛，其次是水牛、牦牛和豬、山羊、綿羊與駱駝等偶蹄類(lèi)家畜，均可自然感染。
5.1.1有的毒株對(duì)牛特別易感，對(duì)豬不易感；對(duì)豬易感者對(duì)牛不易感。
5.1.2豚鼠不會(huì)自然感染，但接種口蹄疫病料后可產(chǎn)生原發(fā)性水皰和繼發(fā)性水皰。
5.1.3乳鼠對(duì)口蹄疫病毒的易感性比豚鼠大10～100倍。據(jù)實(shí)驗(yàn)，用2～5日齡的乳鼠接種口蹄疫病料后，數(shù)日內(nèi)出現(xiàn)痙攣性的麻痹、嘶啞等癥狀，最后導(dǎo)致死亡。有的鼠乳可見(jiàn)不典型癥狀即死亡。所以采用乳鼠接種法對(duì)口蹄疫診斷既經(jīng)濟(jì)又便捷。
5.1.4禽類(lèi)可以人工感染口蹄疫。連續(xù)8次在野鴨的腳趾接種口蹄疫病毒，蹼上可出現(xiàn)水皰。1日齡雛雞用A型Ⅱ號(hào)病毒通過(guò)35代，O型病毒通過(guò)24代，C型病毒通過(guò)20代后，則雛雞砂囊及心臟出現(xiàn)病變癥狀。新孵出的雛雞采用肌肉接種多量的牛源O型病毒后，舌上可現(xiàn)水皰。
5.1.5傳染途徑主要是消化道粘膜及微小損傷的蹄冠、趾間，從皮膚侵入，但呼吸道 更易感染。冬、春季節(jié)發(fā)病率高，幾乎達(dá)到100%。病情急，傳播快，流行廣，夏秋季趨于緩和。
5.2水皰病毒對(duì)豬有很強(qiáng)的易感性，不論品種、年齡、性別。對(duì)牛、羊、馬、豚鼠均不感染。對(duì)1～3日齡乳鼠和吃奶的金田鼠均可通過(guò)人工感染。發(fā)病時(shí)乳鼠后肢麻痹，最后發(fā)生痙攣致死。死鼠的肌肉、內(nèi)臟均帶毒。病豬及胴體、頭、蹄是本病的主要傳播來(lái)源。病豬的糞、尿及污染的飼養(yǎng)工具、運(yùn)輸車(chē)輛、洗涮的污水以及接觸病豬的人都能起到傳播作用。傳染途徑主要是通過(guò)呼吸道、消化道、皮膚粘膜的創(chuàng)傷感染。無(wú)季節(jié)差異，一年四季均有發(fā)生，呈地方性流行。
6.病毒的帶毒部位及臨床癥狀特征
6.1口蹄疫病毒帶毒最多的部位是水皰皮、水皰液。其次為口腔流出的較為粘稠的唾液、分泌的乳汁、陰道的粘液、肌肉、內(nèi)臟、淋巴結(jié)、脊髓、糞尿等均可以帶毒。
6.1.1病初口腔、上下齒齦、舌面、鼻鏡均出現(xiàn)原發(fā)性水皰，隨后體溫升高，蹄冠、趾間、蹄踵部的表皮潮紅、水腫，出現(xiàn)繼發(fā)性水皰。水皰皮薄，內(nèi)含的透明液逐漸變混燭，水皰融合增大成片時(shí)動(dòng)物食欲不振，精神萎頓，俯臥不起。
6.1.2水皰破裂形成爛斑，口腔齒齦、舌、趾間出現(xiàn)水皰糜爛時(shí)體溫趨于正常，走勢(shì)跛行。
6.1.3病牛有吸吮咂唇音，水皰破裂，露出鮮紅色爛斑，流出大量泡沫性口涎掛滿口角和上、下唇，拉成透明線狀，落至地面�；疾∑陂g，奶和肉分泌、生長(zhǎng)停止。犢牛呈惡性病型者死亡率65%。
6.1.4病豬四蹄的蹄冠、趾間、踵及副蹄等部位均出現(xiàn)水皰，約有50%的病豬在鼻鏡、口腔粘膜上有豆?fàn)钏捄蜖�斑，并有流誕現(xiàn)象。成年豬死亡率為3%，仔豬常因惡性病型發(fā)生嚴(yán)重的心肌炎(虎斑心)和急性腸胃炎，死亡率為60%左右。
6.1.5羊多為散發(fā)，口腔粘膜上發(fā)現(xiàn)水皰爛斑和彌漫性炎癥病變，山羊比綿羊更為明顯。主要癥狀在蹄部，50%以上為蹄型口蹄疫。
6.2水皰病豬體以蹄部和鼻鏡上的水皰皮與水皰液內(nèi)含毒量最多。
6.2.1發(fā)病初期，血液、肌肉、內(nèi)臟可帶毒。
6.2.2患病豬的淋巴結(jié)、骨髓、脊髓、糞、尿也可能帶毒。
6.2.3乳鼠、金田鼠因接種水皰病毒材料而發(fā)病死亡后的肌肉、內(nèi)臟均發(fā)現(xiàn)有大量病毒。
6.2.4發(fā)病率20～100%。病初蹄冠、趾間、蹄踵的皮膚發(fā)紅、腫脹、疼痛，站立時(shí)頻頻舉蹄、跛行。隨后蹄踵出現(xiàn)大小不等的水皰，波及趾間、蹄冠。水皰皮內(nèi)有淡黃、淡紅稍混濁的液體。
6.2.5有的僅1～2蹄有水皰，少數(shù)病例發(fā)現(xiàn)4蹄均有水皰，鼻鏡、口腔發(fā)生水皰占4%。
6.2.6體溫不高。嚴(yán)重病例局部化膿、壞死，蹄殼脫落，臥地不起，呈爬行狀，但精神、食欲正常，與患口蹄疫的病豬有明顯區(qū)別。
6.2.7發(fā)現(xiàn)個(gè)別病豬呈興奮癥狀，以頭觸地作轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)。隨后發(fā)生輕癱、麻痹死亡的神經(jīng)癥狀的病例。
7.pH對(duì)病毒的影響
7.1采用組織培養(yǎng)口蹄疫病毒，以不同的pH溶液純組織培養(yǎng)液處理，得出滅活90%病毒所需要的時(shí)間：pH為7或7.5時(shí)病毒最穩(wěn)定，其感染力在持續(xù)5周的觀察中略微減低；pH為8和9時(shí)病毒滅活的速度分別為3周，每周減低90%；pH為6.5和10的樣品，其感染力為14 小時(shí)，減低90%；pH為6的樣品，其感染力每分鐘減低90%，然而約有百萬(wàn)分之一的病毒顆粒至少60分鐘之內(nèi)對(duì)滅活具有抵抗力；pH為 5的樣品，其感染力每秒鐘減低90%，約百萬(wàn)分之一的病毒顆粒在30分鐘之內(nèi)對(duì)滅活具有抵抗力；pH為2、3、4的三種酸化溶液中的病毒滅活太快，無(wú)法測(cè)定。在病豬體內(nèi)(肌肉、內(nèi)臟、淋巴結(jié)、骨髓等)的病毒由于受到組織細(xì)胞、組織液、蛋白質(zhì)等保護(hù)因素的影響，用上述的pH值和時(shí)間的處理顯然不能達(dá)到滅活90%病毒的目的。
7.2水皰病毒既抗酸又抗堿。pH2.0～2.5時(shí)均不被滅活；pH2.0以下的酸性溶液或pH12.5的堿情溶液才能殺死病毒。
8.溫度對(duì)病毒的影響
8.1據(jù)試驗(yàn)，使用純組織培養(yǎng)物，在不同的溫度處理后得出滅活90%的病毒所需的時(shí)間：61℃為0.5分鐘；55℃為2分鐘；49℃為1小時(shí)；43℃為7小時(shí)；37℃為21小時(shí)；20℃為11日；4℃為8周。由于受到組織、細(xì)胞、組織液、蛋白質(zhì)等保護(hù)因素的影響，按上述溫度和時(shí)間處理，同樣也不能達(dá)到滅活90%病毒的目的。如在牛奶中的病毒當(dāng)加溫到85℃、80℃、75℃、70℃時(shí)才會(huì)分別于1、3、15、30、分鐘內(nèi)使其失去感染力。而在水皰皮內(nèi)的病毒，即使在腐敗狀況下亦能存活較長(zhǎng)時(shí)間。在糞池中也可保持39日，污水中可以保持感染力103日之久。牛舌上破裂的水皰皮內(nèi)的病毒經(jīng)過(guò)61℃～63℃的巴氏消毒30分鐘后，仍然殘存具有感染力的病毒。
8.2水皰病病毒對(duì)高溫的抵抗力比較強(qiáng)。存在于死亡乳鼠體內(nèi)的水包病毒，將其稀釋10倍的浸出液，需加溫至72℃1小時(shí)，才能全部殺滅。加溫至70℃時(shí)保持尚有百萬(wàn)分之一的活毒殘存。50℃經(jīng)30分鐘仍有感染力。56℃30分鐘與80℃1分鐘可殺滅。
蹄部經(jīng)65℃～67℃、3～5分鐘燙毛后，水皰皮仍有感染性。1℃～2℃保存10日，病毒滴度未見(jiàn)降低。在豬糞、豬舍中可存留2個(gè)月。4℃的臟泥漿水中70日不會(huì)死亡。18℃～20℃保存病毒存活二年以上。
9.消毒劑對(duì)病毒的作用
9.1據(jù)試驗(yàn)，2%～3%氫氧化納液、1%至2%的高錳酸鉀溶液、1%的甲醛溶液、0.5%的過(guò)氧乙酸溶液等消毒劑對(duì)口蹄疫病毒都有良好的消毒殺滅作用。
9.2水皰病毒對(duì)消毒劑抵抗力較強(qiáng)。10%生石灰乳、2%來(lái)蘇兒、5%漂白粉、20%草木灰水、03%次氯酸鈉液在0℃左右24小時(shí)尚不能使水皰皮中的病毒滅活。5%甲醛溶液在室溫中1.5%小時(shí)能使病毒滅活。10%甲醛溶液在室溫中1小時(shí)能使病毒完全滅活。含有0.5%有效氯的漂白粉溶液，在10℃至25℃環(huán)境下，經(jīng)30分鐘，能殺死病毒。存在死經(jīng)亡乳鼠體內(nèi)的水皰病毒將其稀釋10倍、100倍、1000倍的浸出液，分別用1%、0.5%和0.2%的過(guò)氧乙酸消毒15分鐘，即可殺滅。
10.實(shí)驗(yàn)室診斷的主要方法
10.1口蹄疫的實(shí)驗(yàn)室診斷以乳鼠保護(hù)試驗(yàn)與豚鼠接種試驗(yàn)液為簡(jiǎn)易可行。1～9日齡乳鼠接種試驗(yàn)為陽(yáng)性。也可采用補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)試驗(yàn)與瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)。還可采用交叉免疫法和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)結(jié)合起來(lái)，用于病毒亞型的鑒定。
10.2傳染性水皰病的實(shí)驗(yàn)室診斷、乳鼠血清保護(hù)試驗(yàn)是常用而有效的方法。1～9日齡的乳鼠接種試驗(yàn)為陰性。也可采用血清中和試驗(yàn)予以診斷。還有反向間接血凝實(shí)驗(yàn)法診斷、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和免疫熒光試驗(yàn)、放射免疫瓊脂雙擴(kuò)散對(duì)流電脈病毒中和試驗(yàn)診斷法。
