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綠葉公司規(guī)模豬場VIP活動專區(qū) 135高效保健養(yǎng)豬技術(shù)

公豬精液質(zhì)量評估(二)

2012-05-11 10:34:00來源:互聯(lián)網(wǎng)作者:佚名瀏覽:次 分享:

  5.精子的濃度(或密度)

  精子的濃度是指單位體積精液所含的總精子數(shù)。

  (1)血球計數(shù)板法濃度測定

  精子的濃度可用血球計數(shù)板法進行測定:輕輕搖動精液,用微量移液器(取樣器)取精液100微升,擦去外部精液,加入一次性試管中,用移液管吸取3%氯化鈉溶液3.9毫升(即3900微升)加入精液中,混合均勻,原精液被稀釋了40倍。

  將血球計數(shù)板放在載物臺上,加蓋蓋玻片,用取樣器吸取25微升稀釋后精液加入計數(shù)板與蓋玻片之間的計算室中使計算室充滿。放在顯微鏡下找到計算室,計數(shù)計算室內(nèi)的總精子數(shù),為了減少計數(shù)的工作量,可選擇有代表性的五個中方格,如四角一中心,或斜對角線的五個方格,用紅色框標記的中方格)計數(shù)精子。

  為了避免計數(shù)精子時重復,應以精子的頭數(shù)為準,對在格線上的精子,可依照數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右的原則,計數(shù)五個中方格中的總精子數(shù)。為計算室的一個中方格,在計數(shù)量,在右側(cè)線和下端上的精子(為了識別,標記為白色)是不應進行計數(shù)的精子。

  五個中方格總精子計數(shù)完后得出的結(jié)果,依下列公式進行計算原精子密度(此公式已被簡化):

  精子密度(億個/毫升)=五個中方格總精子數(shù)×0.02

  血球計數(shù)板法是其它光學測定方法的基礎,因為光學的度數(shù)是根據(jù)光學儀器的原理得出的,與精子密度并沒有直接關系,必須有已知的密度值才能獲得對照表。

  (2)分光光度計或精子密度計法

  這種方法是采用光學儀器,根據(jù)精子濃度越高,透光率越低的原理進行精子濃度測定的。在440納米可見光下,用加檸檬酸鈉溶液的比色杯,按100%透過率作空白對照,然后在另一比色杯中加入等量的檸檬酸鈉溶液,再加定量精液,混合均勻后,放入樣本池,讀出透光率讀數(shù)。最后查精子密度查對表,查出精子濃度讀數(shù)。有時提供的對照表是指稀釋后精液的精子濃度,需根據(jù)稀釋倍數(shù),換算出原精液精子濃度。精子密度查對表是用先用血球計數(shù)板測出諾干個精液標準樣本的精子濃度值,然后將其稀釋成不同濃度梯度的樣本,每個樣本的精子濃度均可計算出,測出其透光率,然后制成透光率和精子濃度查對表。

  (3)精子密度杯法

  由鄭州牧業(yè)工程高等?茖W校張長興老師發(fā)明的精子密度杯,可以很方便地進行豬精子密度的測定,而且設備簡單,價格低廉。

  將10毫升生理鹽水加入精子密度杯,根據(jù)采集到精液的色澤,初步判斷精子濃度的高低,可選擇添加原精液0.5毫升、1毫升、2毫升任一個添加量,加入生理鹽水中,對初學者來說,可不必選擇原精液添加量,只需固定地添加1毫升量即可,只是測定值的精確度略低。用拇指壓緊杯口,上下翻轉(zhuǎn)4~5次, 然后在自然光或較強的光照下,將密度杯與眼呈水平,從上向下觀察其讀數(shù)值,再根據(jù)實際添加量,查對照表的相應的列,就可以查到原精液的精子濃度值。

  6.精子的形態(tài)觀察

  精子的形態(tài)觀察主要是觀察精子的畸形率,豬的精子畸形率不能超過20%,否則就必須廢棄。

  7.精子的凝集現(xiàn)象

  與牛羊不同的是,豬的精子很容易發(fā)生凝集。當凝集嚴重時,精液在直觀條件下就可看到精液很不均勻。輕度凝集,可在顯微鏡下觀察到,精子成團存在,有些精子盡管在蠕動,但已經(jīng)失去了前進運動的能力。精子凝集后,凝集的精子失去了活力,使精子活力總體上大幅度下降。因此,凡有輕度凝集的精液,如果活力符合要求,應注意作好記錄,并在精液稀釋后12小時進行活力檢查,如果活力下降很明顯,應考慮將精液廢棄;盍0.7以上,有少量凝集,可用一個+號表示,有明顯的成團精子凝集可用++表示,有大團凝集者為+++。有成團凝集的精液應廢棄。

  精子凝集成團,分布不均  

  取樣稀釋原精液  

  將稀釋后的精液注入計數(shù)室中 

  計數(shù)室的五個中方格

  一 個中方格的精子(白色為不計數(shù)精子)  

  可見光分光光度計  

  抹片與染色

  左側(cè)為正常精子(點狀物為原生質(zhì)),右側(cè)為各種畸形精子

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