豬偽狂犬病是威脅養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病,目前主要采取免疫、監(jiān)測、凈化和嚴(yán)格的生物安全措施進行該病的防控。但由于臨床疫病的復(fù)雜性,特別是后備豬群多個疫苗的多次免疫給豬場地疫病防控帶來了諸多挑戰(zhàn),因此有必要開展聯(lián)合免疫的效力評估,減少免疫次數(shù)可以顯著降低豬群應(yīng)激,提高豬群動物福利水平。
免疫效果觀察
通常情況下,人們認為多個活疫苗的免疫應(yīng)間隔一周。有研究發(fā)現(xiàn),豬偽狂犬病活疫苗(BarthaK61株)聯(lián)合免疫時在免疫早期會干擾豬瘟活疫苗的免疫效果,與對照組相比,豬瘟免疫后抗體略低于單獨免疫組且抗體產(chǎn)生時間有延遲,試驗期間豬瘟抗體聯(lián)合免疫組均低于單獨免疫組。除此之外也有研究發(fā)現(xiàn),豬偽狂犬病活疫苗BarthaK61毒株聯(lián)合免疫時聯(lián)合免疫豬和單獨免疫豬抗體高低有差異,但通過統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)組間并無統(tǒng)計學(xué)差異。
在已有的研究基礎(chǔ)上,筆者使用豬偽狂犬病活疫苗毒株(SA215株)在實驗室和臨床上開展了聯(lián)合免疫實驗研究。研究發(fā)現(xiàn),豬偽狂犬病活疫苗SA215株與不同感染量的豬瘟病毒聯(lián)合免疫后,組間差異不顯著。在實驗中,分別使用1頭份的豬偽狂犬病毒活疫苗(106.3TCID50)與1/5頭份的豬瘟活疫苗(1500RID)和1頭份豬瘟活疫苗(7500RID)聯(lián)合實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn)1頭份的豬偽狂犬病活疫苗與1/5頭份豬瘟活疫苗聯(lián)合免疫后3周豬瘟抗體全部轉(zhuǎn)陽,其阻斷率和組內(nèi)陽性率顯著高于1/5頭份豬瘟單獨免疫組,組間陽性率和阻斷率差異顯著;1/5頭份聯(lián)合免疫組豬瘟抗體阻斷率與1頭份豬瘟活疫苗單獨免疫組結(jié)果一致,組間陽性率和阻斷率差異不顯著。以上結(jié)果表明,豬瘟病毒和豬偽狂犬病聯(lián)合免疫無干擾現(xiàn)象,且偽狂犬病毒活疫苗SA215能夠促進豬瘟活疫苗抗體的產(chǎn)生。
注意事項:
疫苗選擇
建議首選gE/gI/TK三基因缺失活疫苗(如豬偽狂犬病活疫苗SA215株),gE基因缺失可以區(qū)分免疫豬群和野毒感染豬群,而TK基因缺失可以更大限度地降低豬偽狂犬病的毒力,TK缺失毒株在神經(jīng)細胞中幾乎沒有復(fù)制能力,毒力返強和與野毒株發(fā)生重組的概率顯著低于非TK基因缺失株,更為安全有效。此外最重要的是豬偽狂犬病活疫苗SA215株為基因2型毒株,與當(dāng)前我國流行的主要野毒株的免疫保護相關(guān)基因gB、gC和gD同源性在95%以上,其主要抗原區(qū)域同源性高達99%,比基因1型毒株BarthaK61具有更好的匹配性和安全性。使該毒株的陽性血清和Bar?thaK16陽性血清分別測試針對自身的中和抗體和流行野毒中和抗體。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)SA215株對自身和流行野毒中和效價無統(tǒng)計學(xué)差異;BarthaK61對自身和流行野毒株、SA215的中和效價測試中,流行野毒株與SA215無顯著性差異,而與BarthaK61差異顯著,BarthaK61對野毒和SA215的中和抗體效價約為自身的1/2。
聯(lián)合免疫程序
針對仔豬偽狂犬病使用的免疫程序通常為0日齡~3日齡滴鼻,35日齡~70日齡肌肉注射免疫,此外有的豬場在90日齡~120日齡再加強免疫一次。而豬瘟通常在21日齡~35日齡初次肌肉注射免疫,在1個月后加強免疫一次。種豬通常采用1年3次~4次的普免或在分娩前跟胎免疫。
在聯(lián)合免疫中,基于臨床推廣數(shù)據(jù)推薦生產(chǎn)種豬進行一年3次~4次的普免。根據(jù)豬場情況也可以采用跟胎免疫的方式進行。在仔豬免疫中,可以在0日齡聯(lián)合滴鼻免疫各1頭份,35日齡~70日齡肌肉注射混合免疫各1頭份,后備母豬在90日齡~120日齡加強免疫一次,在配種前加強免疫一次。在偽狂犬病活疫苗的滴鼻免疫中,多數(shù)廠家推薦免疫時間在0天~3天,在條件允許的情況下可采用0天滴鼻免疫,其效果優(yōu)于1天~3天滴鼻免疫。實驗中發(fā)現(xiàn)將豬瘟活疫苗和豬偽狂犬病活疫苗聯(lián)合滴鼻也能誘導(dǎo)仔豬產(chǎn)生特定的豬偽狂犬病免疫力,其抗體產(chǎn)生規(guī)律與肌肉注射無顯著性差異。
滴鼻免疫可以使仔豬產(chǎn)生黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫,與肌肉注射相比,滴鼻免疫在抗體產(chǎn)生的時間和強度上無顯著性差異,但是由于滴鼻免疫可以刺激機體產(chǎn)生黏膜免疫抗體,其保護效果優(yōu)于肌肉注射免疫。因此在仔豬免疫中推薦先進行滴鼻免疫,然后采用肌肉注射的免疫方式,在具有黏膜免疫的基礎(chǔ)上,肌肉注射免疫可以激發(fā)黏膜免疫記憶,產(chǎn)生更高滴度的血清中和抗體和黏膜免疫中和抗體。
免疫監(jiān)測
豬偽狂犬病的免疫受母源抗體影響,因此仔豬的肌肉注射免疫應(yīng)充分考慮豬群的母源抗體水平。
仔豬建議在3周~10周對每個周齡采集5份~10份樣品進行豬瘟抗體和豬偽狂犬病gB、gE抗體的檢測,通過檢測結(jié)果掌握豬群群體母源抗體衰減情況。選擇仔豬豬瘟抗體陽性率低于50%的時間點進行免疫。免疫后4、6、8、10周測定仔豬偽狂犬病抗體,確定是否需要加強免疫以及加強免疫的時間點,并在加強免疫后4周測定2次免疫的效果。
在群體條件下,來源于共同親本的豬在母源抗體的衰減中也有較大差異,因此在初次免疫后需要繼續(xù)檢測抗體群體特征,從而確認第二次免疫時間,通過連續(xù)兩次的免疫最大限度維持較高的群體免疫力。
針對種豬,在條件允許的情況下應(yīng)采集不同胎次和不同生產(chǎn)階段的種豬進行抗體檢測,掌握豬群的抗體分布規(guī)律,建議每年檢測3次~4次,并根據(jù)監(jiān)測結(jié)果確定是否調(diào)整免疫程序。