作者:向衛(wèi)紅 王國強 王 吉 柳 武 張衛(wèi)華
精液品質(zhì)檢查
1 精液量:以電子天平稱量精液,按每克1毫升計,避免以量筒等轉(zhuǎn)移精液盛放容器的方法測量精液體積;
2 顏色:正常的精液是乳白色或淺灰白,精子密度越高,色澤愈濃,其透明度愈低。如帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液,若帶有淡紅色或紅褐色是含有血液。這樣的精液須舍棄不用,要會同獸醫(yī)尋找原因;
3 氣味:豬精液略帶腥味,如有異常氣味,應(yīng)廢棄;
4 pH 值(酸堿度):以 pH 計或 pH 試紙測量;
5 精子活率檢查:活率是指呈直線運動的精子百分率,在顯微鏡下觀察精子活率,一般按0.1-1.0的十級評分法進行,鮮精活率要求不低于0.8;檢查活率時要求載玻片和蓋玻片都應(yīng)37℃預(yù)熱;
6 精子密度:指每毫升精液中所含的精子數(shù),是確定稀釋倍數(shù)的重要指標(biāo)。要求用血細胞計數(shù)板進行計數(shù)或精液密度儀測定。血細胞計數(shù)板計數(shù)方法:① 以微量加樣品取具有代表性原精液 200 μL,3% NaCL 1800μL,混勻,使之稀釋10倍;②在血細胞計數(shù)室上放一蓋玻片,取1滴上述精液放入計數(shù)板的槽中,靠虹吸將精液吸入計數(shù)室內(nèi);③ 在高倍鏡下計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子總數(shù),將該數(shù)乘以50萬,即得原精液每毫升的精子數(shù)(即精液密度);
7 精子畸形率:畸形率是指異常精子的百分率,一般要求畸形率不超過 18%,其測定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆薩氏染色,相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率,公豬使用過頻或高溫環(huán)境會出現(xiàn)精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子;畸形精子種類很多,如:巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子,頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或與尾部分離、尾部變曲。要求每頭公豬每兩周檢查一次精子畸形率;
8 認(rèn)真填寫種公豬精液品質(zhì)檢查登記表。
精液稀釋
1 稀釋液
1.1 稀釋液:按稀釋液配方,用稱量紙、電子天平準(zhǔn)確稱量藥品;
1.2 按 1000 mL、2000 mL劑量稱量稀釋粉,置于密封袋中;
1.3 使用前1小時將稱量好的稀釋粉溶于定量的雙蒸水中,可用磁力攪拌器助其溶解。
2 精液稀釋
2.1 精液采集后應(yīng)盡快稀釋,原精貯存不超過30分鐘;
2.2 未經(jīng)品質(zhì)檢查或檢查不合格(活力 0.8 以下)的精液不能稀釋;
2.3 稀釋液與精液要求等溫稀釋,兩者溫差不超過 1℃,即稀釋液應(yīng)加熱37℃左右,以精液溫度為標(biāo)準(zhǔn),來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,絕不能反過來操作;
2.4 稀釋時,將稀釋液沿盛精液的杯(瓶)壁緩慢加入到精液中,然后輕輕搖動或用消毒玻璃棒攪拌,使之混合均勻;
2.5 如作高倍稀釋時,應(yīng)先進行低倍稀釋(1:1-2),待半分鐘后再將余下的稀釋液沿杯壁緩慢加入,以防造成“稀釋打擊”;
2.6 稀釋倍數(shù)的確定:活率≥0.8的精液,一般按每個輸精劑量含30億個有效精子, 輸精量為80-100 mL確定稀釋倍數(shù),例如: 某頭公豬一次采精量是 200 mL ,活力為0.8,密度為2億/ mL,要求每個輸精劑量是30億有效精子,輸精量為80 mL, 則有效精子數(shù)為 200 mL×2 億/ mL×0.8=320 億,輸精頭份為 320億&pide;30 億=11份,加入稀釋液的量為 11×80 mL-200 mL=660 mL;
2.7 稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,如果稀釋前后活力無太大變化,即可進行分裝與保存,如果活力下降,說明稀釋液的配制或稀釋操作有問題,不宜使用,并應(yīng)查明原因加以改進。
精液分裝
1 調(diào)好精液分裝機,以每 80-100 mL為單位,將精液分裝至精液瓶或袋;
2 在瓶或袋上用標(biāo)簽機打上標(biāo)明公豬品種、耳號、生產(chǎn)日期、保存有效期、稀釋液名稱和生產(chǎn)單位等;
3 精液置室溫(25℃)1-2 小時后,放入 17℃精液保存恒溫冰箱貯藏,也可將精液瓶或袋用毛巾包嚴(yán)直接放入17℃精液保存恒溫冰箱內(nèi)。
精液貯存
1 精液須貯存于17℃精液保存恒溫冰箱;
2 短效稀釋液可保存3天、中效稀釋液可保存4-6天、長效稀釋液可保存 7-9天,無論何種稀釋液保存精液,應(yīng)盡快用完;
3 每隔12個小時輕輕搖勻一次,防止精子沉淀而引起死亡。
精液運輸
1 精液運輸應(yīng)置于保溫較好的裝置內(nèi),如:可用雙層泡沫箱,內(nèi)裝 17℃“冰皇”,作為保溫材料;
2 精液運輸過程中避免強烈震動。