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木聚糖酶活性的測(cè)定
目前普遍使用的分析木聚糖酶的方法，主要包括還原糖法、黏度法和以染色底物為基礎(chǔ)的方法。①還原糖和黏度分析法：還原糖分析法沒有專一性，不能用來測(cè)定飼料中少量木聚糖酶的活性。但Nelson/Somogyi還原糖法仍然不失為測(cè)定純木聚糖酶制劑的標(biāo)準(zhǔn)方法。黏度分析法的底物通常是小麥木聚糖(黏度為20cSt～30cSt)，也有用其他的，如來源于燕麥和樺木的木聚糖底物的。黏度分析法主要用來分析內(nèi)切酶的活性。②可溶性的顯色底物法：已有各種染色底物用來分析內(nèi)切1,4-β-D-木聚糖酶。這些底物包括染色的燕麥木聚糖、樺木木聚糖、山毛櫸木聚糖和小麥木聚糖。比較三種可溶性染色木聚糖底物的相對(duì)靈敏度，azo-小麥阿拉伯木聚糖的靈敏度是最高的。③不可溶顯色底物法：通過染色和交鏈制備不可溶的木聚糖，這些木聚糖包括燕麥木聚糖、樺木木聚糖和小麥阿拉伯木聚糖，用這些木聚糖制備水不溶的有色底物。④酶聯(lián)吸附劑分析法：用來分析飼料中β-葡聚糖酶和木聚糖酶活力的酶聯(lián)吸附劑分析法(ELSA)。這種分析法的靈敏度比前面描述的所有方法都高。
β-葡聚糖酶活性的測(cè)定
可以作用于β-葡聚糖的酶很多，包括內(nèi)切真菌纖維素酶和細(xì)菌β-葡聚糖酶。①還原糖法：采用還原糖法和黏度法，以純的β-葡聚糖(從大麥或燕麥中提取)為底物可以直接用來測(cè)定β-葡聚糖酶和纖維素酶。通常是比色法(即Nel-son/Somogyi法)，顯色反應(yīng)與不同聚合度的同源寡糖的還原性末端的含量成比例，由此可以測(cè)量酶活。②黏度分析法：Nelson/Somogyi還原糖法是測(cè)定較純的β-葡聚糖酶活性的理想方法。對(duì)于飼料中的酶活，需要使用黏度法和以使用染色多聚糖作為分析底物的方法，這兩種方法能特定地測(cè)定內(nèi)切水解酶活力，能夠在還原糖本底較高的情況下測(cè)定酶活。③瓊脂平板擴(kuò)散法：將酶樣添加在平板的孔穴中，在含有特定底物的平板上擴(kuò)散。酶活是通過跟蹤平板上特定的染色多糖底物的顏色變化來測(cè)定的，但是只能是半定量的。④可溶性染色底物法：可溶性底物包括azo-CMC和azo-大麥葡聚糖。azo-大麥葡聚糖的靈敏度大約是azo-CMC的3倍。但是該方法并不適于測(cè)定動(dòng)物飼料中微量纖維素酶的活力。⑤不可溶解的染色底物法：不可溶解的染色底物是通過染色和交鏈可溶性的多糖產(chǎn)生染色的交鏈多糖凝膠物。用這些底物進(jìn)行分析，靈敏度要比使用azo-大麥葡聚糖和azo-CMC高3倍～10倍。
